在好氧发酵过程中,发酵罐通气量是影响溶氧(DO)水平和氧传递效率的重要工艺参数。
很多用户在使用5L、10L实验室发酵罐以及50L中试发酵罐时会遇到:
为什么增加空气流量后,DO仍然下降?
为什么通气量提高后,泡沫明显增加?
为什么实验室培养正常,放大到中试阶段却出现供氧不足?
这些问题不仅与通气量有关,还受到搅拌系统、培养液性质以及氧传递能力(KLa)的共同影响。
合理的发酵罐空气流量控制,需要结合培养阶段、菌体耗氧情况以及设备传质能力进行调整。
在发酵过程中,空气通过进气系统进入培养液,形成气泡,氧气需要经过气液传递后才能被微生物利用。
整个过程包括:
空气进入 → 气泡分散 → 氧气溶解 → 细胞吸收
通气量主要影响:
1、进入发酵系统的氧气供应量
2、气液接触面积
3、氧传递效率(KLa)
对于大肠杆菌、酵母等高耗氧培养体系,如果氧供应无法满足细胞需求,就容易出现:
1、DO下降
2、菌体生长速度降低
3、发酵周期延长
4、产物浓度下降
从工程角度看,发酵过程中的氧供应通常可以理解为:
氧传递速率(OTR)需要满足氧消耗速率(OUR)。
当:
OTR < OUR
时,培养体系无法获得足够氧气,DO就会逐渐降低。
在发酵工艺中,通气量通常使用vvm表示。
vvm(volume per volume per minute)表示:
每分钟进入发酵罐的空气体积与培养液体积的比值。
计算公式:
vvm = 空气流量(L/min)÷ 培养液体积(L)
例如:
一个5L玻璃发酵罐,实际装液量为3L。
如果空气流量设置为1.5L/min:
vvm = 1.5 ÷ 3 = 0.5 vvm
表示每分钟通入相当于培养液50%的空气量。
实验室发酵罐通常通过转子流量计或质量流量控制器(MFC)实现空气流量控制,使不同培养阶段保持稳定供氧。
不同设备由于:
1、搅拌结构
2、叶轮形式
3、罐体比例
4、氧传递能力
存在差异,因此相同vvm条件下,最终DO表现也可能不同。
| 设备规模 | 典型工作体积 | 常用通气范围 |
|---|---|---|
| 1L-5L实验室发酵罐 | 0.5-3L | 0.3-1.5 vvm |
| 10L实验室发酵罐 | 5-7L | 0.3-1.0 vvm |
| 50L中试发酵罐 | 30-40L | 0.2-1.0 vvm |
实际运行过程中,需要结合:
1、微生物耗氧速率(OUR)
2、培养液黏度
3、搅拌能力
4、设备KLa水平
进行综合调整。
增加空气流量后:
1、气泡数量增加
2、气液接触面积扩大
3、氧气进入培养液速度提高
因此通常能够提升DO水平。
但是,通气量并不是越大越好。
实际项目中经常遇到:
为了提高DO不断增加空气流量,但最终发现泡沫增加,而发酵效果改善并不明显。
原因在于:
氧传递不仅取决于空气供应,还受到:
1、搅拌强度
2、气泡停留时间
3、发酵液状态
等因素影响。
如果搅拌无法有效分散气泡,提高空气流量带来的氧传递提升会非常有限。
通气量过高会导致:
1、气泡数量增加
2、液面扰动增强
3、泡沫层升高
可能造成:
1、DO电极、pH电极表面附着气泡
2、消泡剂使用增加
3、发酵环境波动
空气进入过快时,气泡可能快速离开发酵液。
部分氧气还未充分溶解,就随尾气排出。
结果可能导致:
1、空气消耗增加
2、氧利用效率降低
3、DO提升效果有限
过大的通气量可能影响:
1、CO?释放
2、pH变化趋势
3、细胞代谢状态
因此,通气量需要根据发酵阶段动态调整。
实际发酵过程中,经常会出现:
“空气已经开大,但DO还是下降。”
主要原因包括:
随着发酵进行:
细胞数量增加 → OUR提高 → 氧需求增加。
当氧传递能力无法同步提升时,DO会持续下降。
通气和搅拌需要协同作用。
如果搅拌不足:
1、气泡无法充分分散
2、气液传质效率降低
即使增加空气流量,DO改善也有限。
部分发酵体系后期黏度增加,会降低:
1、混合效率
2、氧扩散能力
导致DO下降。
主要用于:
1、菌种筛选
2、工艺条件优化
3、实验验证
重点关注:
1、空气流量调节范围
2、DO响应速度
3、搅拌与通气匹配
10L设备通常用于工艺开发阶段。
相比5L设备,需要关注:
1、参数重复性
2、氧传递能力
3、放大参考价值
50L属于实验室向生产过渡的重要阶段。
放大过程中不能简单按照体积比例增加空气流量,需要综合考虑:
1、KLa变化
2、搅拌功率
3、OUR变化
4、混合时间
否则容易出现:
小试DO正常,中试供氧不足。
现代实验室发酵罐通常采用DO级联控制方式。
当DO低于设定值时,控制系统可以根据工艺需求自动调整:
通过多参数协同,提高发酵过程稳定性。
因此,5L-50L玻璃发酵罐以及不锈钢中试发酵系统,不仅需要精准空气流量控制,还需要结合:
1、DO在线检测
2、pH控制
3、搅拌控制
形成完整的过程控制方案。
某实验室使用5L玻璃发酵罐进行高密度菌培养。
发酵前期:
1、搅拌:400 rpm
2、通气:0.5 vvmDO保持稳定
进入发酵中后期后,由于菌体浓度增加,OUR提高,DO下降至30%左右。
通过调整:
1、提高搅拌速度
2、增加通气量至1.0 vvm
DO恢复稳定,发酵过程得到改善。
该案例说明:DO控制不是单独依靠增加空气完成,而需要:搅拌 + 通气 + 在线DO检测共同实现。
发酵罐通气量是影响氧传递和DO控制的重要参数。
合理提高空气流量,可以改善氧供应;但过大的通气量可能导致泡沫增加、氧利用率下降等问题。
对于5L、10L实验室发酵罐以及50L中试发酵罐,通气系统需要与搅拌系统、DO检测和自动控制系统进行整体匹配。
合理的发酵罐空气流量控制,不仅能够提高实验重复性,也能够降低从实验室到中试放大的风险。

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